细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备F-12K培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
公司细胞现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
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产品名称
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规格
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型号
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兔主动脉平滑肌细胞
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5×10?Cells/T25培养瓶
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GOY-01X0804
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冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验事项：
1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。
1瓶 Ramos细胞株 Ramos 低温运输和保存
胰蛋白胨大豆琼脂 5kg/袋
1瓶 Malme-3M细胞株 Malme-3M 低温运输和保存
250mL Yeast Lysis Buffer (for mini prep) Yeast Lysis Buffer (for mini prep) 常温保存
5g 辛甲基硫吡喃葡萄糖苷 OTG 常温保存
2 ug pVgRXR pVgRXR 低温运输，-20℃保存
50次 磁珠植物DNAout MAG Plant DNAOUT 常温保存（磁珠4℃保存）
2 ug P36 P36 低温运输，-20℃保存
双岐杆菌生化用基础培养基 The Biochemical Basis of Bifidobacterium Medium 250g
5g L- L-Tryptophan 室温干燥保存
50T 猪牛绦虫PCR检测试剂盒 低温运输，-20℃保存
500g 四硼酸钠，十水 Sodium Tetraborate Decahydrate 室温保存
25mL Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (non reducing,4X) Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (non reducing,4X) 常温保存
30次 单细胞全基因组扩增试剂盒 Single Cell WGA Kit -20℃保存
兔主动脉平滑肌细胞乳制品总乳酸比色法定量检测试剂盒 20次
环境钙离子浓度荧光定量检测试剂盒 20次
通用型牛病毒性腹泻病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）20次
细胞NF KAPPA B P65蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 10/20次
营养补充剂L-天门冬酰胺化学比色法定量检测试剂盒 20次
土壤DNA高质纯化试剂盒 20次
通用型李属坏死环斑病毒（Prunus Necrotic Ringspot Virus；PNRSV）20次
真细胞可溶性总蛋白制备试剂盒 20次
DMEM细胞培养基（无酚红）500毫升
乳制品D-半乳糖含量光谱法定量检测试剂盒 20次
真/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量检测试剂盒 20次
通用型黄瓜花叶病毒（Cucumber Mosaic Virus；CMV）20次