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人肺大动脉平滑肌细胞

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产品名称: 人肺大动脉平滑肌细胞
产品型号: GOY-01X0685
产品展商: 谷研
产品文档: 无相关文档
发布时间:2023-02-10

简单介绍

人肺大动脉平滑肌细胞在实验过程中,根据要求可始终保持人肺大动脉平滑肌细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括人肺大动脉平滑肌细胞的形态、结构、生命活动等。


人肺大动脉平滑肌细胞  的详细介绍

下列是产品的订购信息:

产品名称

规格

型号

人肺大动脉平滑肌细胞

5×10?Cells/T25培养瓶

GOY-01X0685

细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)?;灰翰?检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
    2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
    3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
   1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
   2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
   3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

5mg 氨基喋呤 Aminopterin -20℃保存

2500mL Tricine Buffered Saline,5X,pH8.0  Tricine Buffered Saline,5X,pH8.0  常温保存

50mL Q交换介质 Q Medium 常温干燥封袋保存

2 ug pTet-On advanced pTet-On advanced 低温运输,-20℃保存

100mL 非冻型尿液DNA保存液 Urine DNALOCKER 室温

2 ug pDsRed1-N1 pDsRed1-N1 低温运输,-20℃保存

1%棉籽糖的PY培养基  1ml*20支

1kg 变色硅胶 Silica Gel 室温干燥保存

50T 血清型耶尔森氏菌ail基因常规PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

200 mL 人肿瘤细胞分离液1.055 Cell Separation Solution -20℃保存

100mL HEPES Buffer,0.5M,pH7.0  HEPES Buffer,0.5M,pH7.0  常温保存

0.1mL 绿如蓝染料,PCR级 DNAGREEN, PCR Grade -20℃保存

2 ug pLenti 6/TR pLenti 6/TR 低温运输,-20℃保存

芽孢杆菌培养基 Bacillus Megatherium Medium 250g

人肺大动脉平滑肌细胞通用型甘薯黑斑?。?/span>Ceratocystis fimbriata)基因检测试剂盒 20次

组织甲基化组蛋白H3-K9染色质沉淀分析(CHIP)试剂盒 10次

植物脂质比色法定量检测试剂盒 20次

通用型维生素A含量比色法定量检测试剂盒 20次

细胞凋亡诱导(DNA合成抑制)试剂盒 20次

植物果聚糖化学比色法定量检测试剂盒 20次

动物细胞甲磺酸乙脂诱导突变试剂盒 10/20次

通用型牛Q热?。≦ Fever)基因检测试剂盒 20次

PAR-1蛋白表达西方杂交分析试剂盒 5次

植物酸性蔗糖转化酶(acid invertase)活性比色法定量检测试剂盒 20次

载玻片细胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 10/20次

通用型马莱姆症嗜吞噬细胞无形体(Lyme and Anaplasma Phagocytophilum)基因检测试剂盒 20次

 

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