细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备F-12K培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜?；灰翰⒓觳橄赴芏取?/span>
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
公司细胞现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
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产品名称
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规格
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型号
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BT-474 [BT474] (人乳腺导管癌细胞)
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1×10?cells/T25培养瓶
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GOY-01X0040
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冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验事项：
1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。
质量规格：进分SigmaP4394Zearalanone
质量规格：>98.5%,细胞培养级,BR2,3Dihydroxybenzoicacid,99%
质量规格：HPLC>98%,标准品2Hydroxyphenylaceticacid,99%
质量规格：>99.0%,USP34,BR,可用于细胞培养3Methoxyphenylaceticacid,≥99%
质量规格：>97%,USP34,BRBis(2ethylhexyl)Azelate,98%
质量规格：HPLC>95%,标准品Diisobutylphthalate,99%
质量规格：克林含量>758μg/mg,USP32Bis(methylglycol)phthalate,≥90%
质量规格：用于含量测定3Aminobenzeneboronicacid,98%
质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养4Vinylphenylboronicacid
质量规格：>97%,BRPyridaben
质量规格：HPLC>97%,标准品Imidacloprid
质量规格：>98.5%,BR,可用于细胞培养Tetramethylthiuramdisulfide,97%
质量规格：HPLC>98%,标准品Glycocholicacidhydrate,≥97%
质量规格：≥19000IU/mg,EP62,6Dimethylphenol,99%
质量规格：效价测定Linalool,97%
现货供应 CleavedCaspase3 p17 (D175) Polyclonal CleavedCaspase3 p17 (D175)
现货供应 CleavedCaspase3 p17 (D175) Polyclonal CleavedCaspase3 p17 (D175)
现货供应 CleavedCaspase3 p12 (D175) Polyclonal CleavedCaspase3 p12 (D175)
现货供应 CleavedCaspase2 p18 (G170) Polyclonal CleavedCaspase2 p18 (G170)
现货供应 CleavedC1s HC (R437) Polyclonal CleavedC1s HC (R437)
现货供应 CleavedC1r LC (I464) Polyclonal CleavedC1r LC (I464)
现货供应 CleavedBad (D71) Polyclonal CleavedBCL2细胞死亡拮抗因子(D71)
现货供应 Cleaved PARP Monoclonal Cleaved PARP
现货供应 Cleaved PARP Monoclonal Cleaved PARP
现货供应 AntiCLCK CLCK抗体（50 ul)
BT-474 [BT474] (人乳腺导管癌细胞) DIRAS1 RAS相关抑细胞生蛋白1抗体 规格: 0.2mlPhospho-MYPT1 (Ser668) 磷酸化肌球蛋酸酶抗体 规格: 0.1ml
MRP4/ABCC4 多药耐药相关蛋白4抗体 规格: 0.1mlISLR2 ISLR2蛋白抗体 规格: 0.2ml
TXA2R 栓素A2受体抗体 规格: 0.2mlPorimin 前细胞胀亡受体诱导膜损伤蛋白抗体 规格: 0.2ml
CCDC56 卷曲螺旋结构域蛋白56抗体 规格: 0.2ml
phospho-CDH2 (Tyr820) 磷酸化N-钙粘附分子抗体 规格: 0.1ml
SCHAD/HADHSC(mouse, rat) 短链L-3羟烷基辅酶A脱酶抗体（小鼠，大鼠） 规格: 0.2ml
FAM89B/MMTV-R 瘤毒受体同源蛋白抗体 规格: 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/AP 碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml
Junctophilin 4 连接蛋白JPH4抗体 规格: 0.2ml
G Protein alpha Inhibitor 1 G蛋白α抑制蛋白1抗体 规格: 0.2ml