细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备F-12K培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜?;灰翰⒓觳橄赴芏?。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
公司细胞现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
产品名称
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规格
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型号
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A549 [A-549] (人非小细胞肺癌细胞)
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1×10?cells/T25培养瓶
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GOY-01X0016
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冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验事项:
1. 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。
N乙?;羌锥襁騈Carbobenzoxyεaminocaproic acid5G通用试剂
磺甲恶唑 βD葡萄糖苷6Aminocaproic acid (≥99%)100G通用试剂
头孢匹罗NAcetylDLalanine5G通用试剂
阿米舒必利d52,4Pentanedione (≥99.5%)100ML通用试剂
美罗培南碳Actinomycin C (≥95%, HPLC)5MG碳水合物
美罗培南盐Ammonium pyrrolidinedithiocarbamate (P...1G碳水合物
6,8二甲氧基莫西沙星盐盐Pectin from apple25G碳水合物
8乙氧基莫西沙星Heparin sodium (≥140 units/mg)50KU碳水合物
8去甲氧基8氟莫西沙星Dextrin from corn (Type I, powder)100G碳水合物
外消旋顺式莫西沙星?;?/span>βD葡萄糖苷L()Galactose (≥99%)100MG碳水合物
莫西沙星盐盐一水合物DLLactic acid (88%92%, USP grade)100ML碳水合物
8氟6甲氧基莫西沙星Chitin from crab shells (for analysis ...1G碳水合物
(R)?;丈翫葡萄糖苷苄基酯Chitin from crab shells (≥95%, practi...100G碳水合物
(S)酰基普生βD葡萄糖苷苄基酯D(+)Xylose (SigmaUltra, ≥99%)5G碳水合物
(R)O去甲基普生5Bromo4chloro3indolyl βDglucur...10MG碳水合物
现货供应 DNA Methyltransferase 3a (Clone 64B814.1) (DNMT3, DNMT3A) DNA Methyltransferase 3a (克隆号64B814.1)抗体
现货供应 DNA Methyltransferase 3a (Clone 64B1446) (DNMT3, DNMT3A) DNA Methyltransferase 3a (克隆号64B1446)抗体
现货供应 DNA Methyltransferase 2 (DNMT2) DNA Methyltransferase 2抗体
现货供应 DNA Methyltransferase 2 (Clone 102B1259.2) (DNMT2) DNA Methyltransferase 2 (克隆号102B1259.2)抗体
现货供应 DNA Methyltransferase 1 (Clone 60B1220.1) (DNMT1) DNA Methyltransferase 1 (克隆号60B1220.1)抗体
现货供应 DNA Binding Protein7 (DBP7) ,DNA Binding Protein 7,DNA Binding Protein7 DNA Binding Protein7 (DBP7)抗体
现货供应 DMRTD Polyclonal DMRT样家族C2
现货供应 DMP1 ,DMP1,DMP 1 DMP1抗体
现货供应 DMAP1 ,DNMAP 1,DNMAP1,EAF 2,EAF2,FLJ11543,KIAA1425 ,MGC55593,SWC 4 ,SWC4,zgc:55593 DMAP1抗体
现货供应 DLK1 (CT) (Deltalike 1 homolog, DLK, FA1, ZOG, pG2, Delta1, PREF, PREF1) DLK1抗体(C末端)
A549 [A-549] (人非小细胞肺癌细胞) DDX19B/DBP5 解旋酶DEAD5抗体 规格: 0.1ml
Salmonella typhimurium 鼠伤寒沙门氏 0.2ml
Mouse Anti-rat IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.1ml
BADH2 BADH2抗体(水稻) 规格: 1ml
CD59 CD59抗体 规格: 0.2ml
Mouse Anti-Bov IgG/Bio 生物素标记的小鼠抗牛IgG 规格: 0.1ml
phospho-GADD153 (Ser30) 磷酸化GADD153抗体 规格: 0.1ml
Rab25 基因RAS相关蛋白Rab25抗体 规格: 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗猪IgG 规格: 0.1ml
Zfp91 白相关新基因抗体 规格: 0.2ml