特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称
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规格
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货号
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禽流感病毒H5/H7/H9亚型(AIV-H5/H7/H9)核酸检测试剂盒
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50T
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GOY-M1889
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组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
冰冻切片神经纤维银染试剂盒 50次
石蜡切片神经组织固蓝(FAST BLUE)染色试剂盒 50次
冰冻切片神经组织固蓝(FAST BLUE)染色试剂盒 50次
石蜡切片神经元高尔基法(GOLGI)染色试剂盒 20次
冰冻切片神经元高尔基法(GOLGI)染色试剂盒 20次
全组织神经元高尔基法(GOLGI)染色试剂盒 10次
石蜡切片神经胶质染色试剂盒 50次
冰冻切片神经胶质染色试剂盒 50次
石蜡切片淀粉样蛋白(AMYLOID)染色试剂盒 50次
冰冻切片淀粉样蛋白(AMYLOID)染色试剂盒 50次
石蜡切片神经元胞浆尼斯(NISSL)染色试剂盒 50次
冰冻切片神经元胞浆尼斯(NISSL)染色试剂盒 50次
禽流感病毒H5/H7/H9亚型(AIV-H5/H7/H9)核酸检测试剂盒钌标准溶液(1000μg/ml,介质:2.0mol/L HCl) Ruthenium solution 7440-18-8 质量规格:1000μg/ml,介质:2.0mol/L HCl 动物糖蛋白酶解法N-糖基分解试剂盒 进口/国产 规格:20次
铑标准溶液(1000μg/ml,溶剂:2.0Mol/L HCl) Rhodium solution 7440-16-6 质量规格:1000μg/ml,溶剂:2.0Mol/L HCl 动物糖蛋白酶解法O-糖基分解试剂盒 进口/国产 规格:20次
铼标准溶液(1000μg/ml;溶剂:1.5mol/L硝酸) Rhenium standard 7440-15-5 质量规格:1000μg/ml;溶剂:1.5mol/L硝酸 动物糖蛋白酶解法完全糖基分解试剂盒 进口/国产 规格:20次
二氧化硅标准溶液(1000μg/ml,介质:0.05mol/L NaOH) Silicon dioxide solution 60676-86-0 质量规格:1000μg/ml,介质:0.05mol/L NaOH 动物糖蛋白化学法完全糖基分解试剂盒 进口/国产 规格:20次
银标准溶液(1000μg/ml) Silver standard 7440-22-4 质量规格:1000μg/ml 动物糖蛋白酶解法非N非O糖基磷脂酰肌醇(GPI)分解试剂盒 进口/国产 规格:20次
银标准溶液(100μg/mL,基体:1%HNO3) Silver standard 7440-22-4 质量规格:100μg/mL,基体:1%HNO3 动物糖蛋白电泳迁移检测试剂盒 进口/国产 规格:5次
钪标准溶液(1000μg/mL,基体:10%HCL) Scandium standard 7440-20-2 质量规格:1000μg/mL,基体:10%HCL 动物细胞糖蛋白高希尔(PAS)法阿尔新蓝(ALCIAN BLUE)染色试剂盒 进口/国产 规格:50次
钐标准溶液(1000μg/ml) Samarium standard 7440-19-9 质量规格:1000μg/ml 动物组织石蜡切片糖蛋白高希尔(PAS)法阿尔新蓝(ALCIAN BLUE)染色试剂盒 进口/国产 规格:50次
锡标准溶液(1000μg/ml) Tin standard 7440-31-5 质量规格:1000μg/ml 动物组织冰冻切片糖蛋白高希尔(PAS)法阿尔新蓝(ALCIAN BLUE)染色试剂盒 进口/国产 规格:50次
锡标准溶液(100μg/mL,基体: 10%HCl) Tin standard 7440-31-5 质量规格:100μg/mL,基体: 10%HCl 动物全组织糖蛋白高希尔(PAS)法阿尔新蓝(ALCIAN BLUE)染色试剂盒 进口/国产 规格:10次
碲标准溶液(100μg/ml,基体:HCI) Tellurium standard 13494-80-9 质量规格:100μg/ml,基体:HCI 糖蛋白电泳高希尔(PAS)法阿尔新蓝(ALCIAN BLUE)染色试剂盒 进口/国产 规格:5次
铥标准溶液(1000μg/mL,基体:10%HCL) Thulium standard 7440-30-4 质量规格:1000μg/mL,基体:10%HCL 聚糖对氨基苯甲酸(2-AA)荧光标记试剂盒 进口/国产 规格:20次
钒标准溶液(500mg/L,溶剂:水) Vanadium standard 7440-62-2 质量规格:500mg/L,溶剂:水 聚糖对氨基苯甲酰胺(2-AB)荧光标记试剂盒 进口/国产 规格:20次
钒标准溶液(100mg/L,基体:1%HCI) Vanadium standard 7440-62-2 质量规格:100mg/L,基体:1%HCI 聚糖邻氨基吡啶(2-AP)荧光标记试剂盒 进口/国产 规格:20次