使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称
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规格
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货号
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肉毒杆菌A型(CB-A)核酸检测试剂盒
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50T
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GOY-M1793
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特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
C. tropicalis RFLP基因分析试剂盒 20次
C. krusei RFLP基因分析试剂盒 20次
C. guilliermondii RFLP基因分析试剂盒 20次
C. parapsilosis RFLP基因分析试剂盒 20次
Cr. Neoformans RFLP基因分析试剂盒 20次
A. fumigatus RFLP基因分析试剂盒 20次
F. solani RFLP基因分析试剂盒 20次
Helicobacter pylori RFLP基因分析试剂盒 20次
M. tuberculosis RFLP基因分析试剂盒 20次
M. marinum RFLP基因分析试剂盒 20次
M. scrofulaceum RFLP基因分析试剂盒 20次
M. avium RFLP基因分析试剂盒 20次
肉毒杆菌A型(CB-A)核酸检测试剂盒达格列净一水丙二醇 ;丙二醇达格列嗪水合物 Dapagliflozin propanediol hydrate 960404-48-2 质量规格:>99% 细胞CASPASE-1蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
安塞曲匹/胆固醇脂转移蛋白阻滞剂 Anacetrapib;MK0859 875446-37-0 质量规格:>98% 载玻片细胞CASPASE-1蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
达比加群酯 Dabigatran etexilate 211915-06-9 质量规格:>97% 冰冻切片组织CASPASE-1蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
利伐沙班 Rivaroxaban 366789-02-8 质量规格:纯度≥98% 石蜡切片组织CASPASE-1蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
利伐沙班(标准品) Rivaroxaban 366789-02-8 质量规格:≥98%,标准品 载玻片细胞CASPASE-1蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
阿哌沙班 Apixaban 503612-47-3 质量规格:>98.5%,选择性活化Ⅹ因子抑制剂 冰冻切片组织CASPASE-1蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
哌立福新(KRX-0401) Perifosine 157716-52-4 质量规格:>98%,蛋白激酶B(Akt)信号通路阻断剂 石蜡切片组织CASPASE-1蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
盐酸阿那格雷 Anagrelide hydrochloride 58579-51-4 质量规格:>98% 细胞CASPASE-1蛋白表达比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:10/50 次
甲磺酸沙奎拉韦 Saquinavir mesylate 149845-06-7 质量规格:>98% 细胞CASPASE-1蛋白表达荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格:10/50 次
伐地那非三水合盐酸盐 Vardenafil hydrochloride trihydrate 224785-90-4 质量规格:>98%,三水合物 CASPASE-1蛋白表达西方杂交分析试剂盒 进口/国产 规格:5次
伐地那非三水合盐酸盐(标准品) Vardenafil hydrochloride trihydrate 224785-90-4 质量规格:HPLC>98%,标准品 CASPASE-1蛋白**共沉淀分析试剂盒 进口/国产 规格:5次
抑氨肽酶,乌苯美司,贝他定,苯丁抑制素 Bestatin,Ubenimex 58970-76-6 质量规格:>98.5%,BR,可用于细胞培养 CASPASE-1蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 进口/国产 规格:25次
抑氨肽酶(进口) Bestatin,Ubenimex 58970-76-6 质量规格:>99%,美国进口sc-202975 细胞CASPASE-2蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
高藜芦酸(标准品) (3,4-Dimethoxyphenyl)acetic acid 93-40-3 质量规格:HPLC≥98.0% 载玻片细胞CASPASE-2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次