实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。zui好设立一个专用的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤高压。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
公司供应的所有产品仅用于科研，参数规格如下：
产品名称：病毒性出血性败血症病毒(VHSV)核酸检测试剂盒
货号：GOY-M1748
规格：50T
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
二苯胺（DPA）DNA比色法定量测定试剂盒 10次
二氨基苯甲酸（DABA）DNA比色法定量测定试剂盒 20次
铽盐（terbiumIII）单链DNA荧光定量测定试剂盒 20次
PICO GREEN双链DNA荧光定量测定试剂盒 20次
胶回收或PCR产物纯化试剂专题
λDNA （HINDIII）标准样（100至2000碱基） 50次
一步法胶回收试剂盒 20次
高质纯化胶回收试剂盒 20次
聚丙烯酰胺凝胶粉碎法胶回收试剂盒 20次
高质纯化聚丙烯酰胺凝胶粉碎法胶回收试剂盒 20次
初级离心柱DNA回收试剂盒 20次
**离心柱DNA回收试剂盒 20次
病毒性出血性败血症病毒(VHSV)核酸检测试剂盒盐酸咪唑（标准品） Levamisole HCl 16595-80-5 质量规格：UV法含量测定 组织超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
盐酸氯米帕明/盐酸氯丙咪嗪 Clomipramine HCL 17321-77-6 质量规格：>99%,BR 血液超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
盐酸氯米帕明/盐酸氯丙咪嗪（标准品） Clomipramine HCL 17321-77-6 质量规格：HPLC>98%,标准品 体液超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
硫酸氢氯吡格雷 I型 Clopidogrel Bisulfate 120202-66-6 质量规格：>98%,I型 体内（in vivo）超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
硫酸氢氯吡格雷 II型(标准品) Clopidogrel Bisulfate 120202-66-6 质量规格：>98%,标准品 酵母超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
硫酸氢氯吡格雷 II型 Clopidogrel Bisulfate 120202-66-6 质量规格：含量97.0%-101.5%，II型 植物超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
萘丁美酮/萘普酮 Nabumetone 42924-53-8 质量规格：>99% 甲萘醌溶液（1毫摩尔） 进口/国产 规格：50毫升
萘丁美酮/萘普酮（标准品） Nabumetone 42924-53-8 质量规格：HPLC>98%,标准品 过氧亚硝基阴离子解构剂FeTMPyP pentachloride 进口/国产 规格：1毫升
地瑞拉韦 Darunavir 206361-99-1 质量规格：>98% 超氧阴离子**剂TEMPOL溶液 进口/国产 规格：1毫升/500毫摩尔
沃氏物 Methoxydienone 2322-77-2 质量规格：含量≥85% 细胞脂质过氧化氢（H2O2）活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
DL-α-羟基戊二酸二钠 DL-α-Hydroxyglutaric acid disodium salt 40951-21-1 质量规格：98%,GC,进分sigma 94577 组织脂质过氧化氢（H2O2）活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
地美溴胺 Demecarium Bromide 56-94-0 质量规格：>99%,BR 植物脂质过氧化氢（H2O2）活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
去氧孕烯 Desogestrel 54024-22-5 质量规格：>98% 食物脂质过氧化氢（H2O2）活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
地索奈德 Desonide 638-94-8 质量规格：>98.5% 细胞脂质过氧化物（MDA）活性TBARS比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：50次