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大肠杆菌PCR检测试剂盒

如果您对该产品感兴趣的话,可以
产品名称: 大肠杆菌PCR检测试剂盒
产品型号: GOY-M1226
产品展商: 谷研
产品文档: 无相关文档
发布时间:2022-11-16

简单介绍

大肠杆菌PCR检测试剂盒注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。


大肠杆菌PCR检测试剂盒  的详细介绍

公司供应的所有产品仅用于科研,参数规格如下:

产品名称:大肠杆菌PCR检测试剂盒

货号:GOY-M1226

规格:50T

分类:PCR检测试剂盒

储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。

运输:低温、避光,快递免费送货上门。

储存条件:

14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法

1. 血清:使用不含热原和内试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。

3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
    

实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
CIN-1琼脂平板9cm 英文名称:Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 产品规格:10个/包

CIN培养基 英文名称:Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 产品规格:250g

改良克氏双糖铁培养基管 英文名称: 产品规格:5ml*20支

改良Y平板 英文名称: 产品规格:9cm*10个

小肠结肠炎耶尔森氏成套生化鉴定管 英文名称: 产品规格:10种*2套/盒*5盒

改良番茄汁培养基 英文名称:Tomato Juice Agar,Modified 产品规格:250g

MC培养基 英文名称:Chalmers Agar,Modified 产品规格:250g

BLB琼脂 英文名称:BLB agar 产品规格:250g

MRS琼脂 英文名称:MRS Agar 产品规格:250g

LBS琼脂 英文名称:LBS agar 产品规格:250g

M17琼脂 英文名称:M17 Agar 产品规格:250g

M17肉汤 英文名称:M17 Broth 产品规格:250g

乳酸杆选择性琼脂 英文名称:Lactobacillus Selective Agar 产品规格:250g

APT琼脂 英文名称:APT Agar 产品规格:250g

大肠杆菌PCR检测试剂盒细胞表面趋化因子受体6抗体 规格: 0.1ml  英文名称: BONZO

肿瘤转移抑制蛋白BAMBI抗体 规格: 0.1ml  英文名称: BAMBI

原卟啉氧化酶3抗体 规格: 0.2ml  英文名称: Coproporphyrinogen III Oxidase

异染色体同源蛋白1抗体 规格: 0.2ml  英文名称: CBX1

卷曲螺旋结构域蛋白22抗体 规格: 0.2ml  英文名称: CCDC22

CD105抗体 规格: 0.1ml  英文名称: CD105

甘油二酯胆碱磷酸转移酶抗体 规格: 0.2ml  英文名称: CHPT1

黑色素瘤相关抗原抗体 规格: 0.1ml  英文名称: CD63

19号染色体开放阅读框2抗体 规格: 0.1ml  英文名称: C19orf2

补体C1S链多肽抗体 规格: 0.2ml  英文名称: C1s

胞浆型磷脂酶A2抗体 规格: 0.2ml  英文名称: CPLA2 beta

实验过程:

一、试剂准备

1. DNA模板

2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步骤

1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1(10pM)               2μl

引物2(10PM)              2μl

Taq酶(2U/μl)            1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

ddH2O至               50 μl

PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。

2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。

3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

三、注意事项

1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。zui好设立一个专用的PCR实验室。

2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。

3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。

4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤高压。

5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。

6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高。

7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。

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