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滴虫通用PCR检测试剂盒

如果您对该产品感兴趣的话,可以
产品名称: 滴虫通用PCR检测试剂盒
产品型号: GOY-M1099
产品展商: 谷研
产品文档: 无相关文档
发布时间:2022-11-15

简单介绍

滴虫通用PCR检测试剂盒保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。


滴虫通用PCR检测试剂盒  的详细介绍

特点:

 

1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。

2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。

3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。

4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。

5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。

6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。

服务流程:

接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

滴虫通用PCR检测试剂盒

50T

GOY-M1099

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。

实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

尿素琼脂(PH7.2) Urease Agar Base 250g

新生霉素(125ug/支)  125ug/支*5

大豆胰酪蛋白胨肉汤(含亚硫酸铁) Trypticase Soy Broth with Ferrous Sulfate 250g

半固体营养琼脂 Semisolid Nutrient Agar 250g

麦康凯琼脂(MAC) MaConkey Agar 250g

酚红煌绿琼脂 Phenol Red Brilliant Green Agar 250g

乳糖肉汤培养基 Lactose Broth Medium 500g

脱氧胆盐柠檬酸盐琼脂培养基 Deoxycholate Citrate Agar Medium 250g

志贺氏(BCT)增液  250g

半固体琼脂管  6ml*10支

弧检验检验培养基  

碱性蛋白胨水 Alkaline Peptone Water 250g

TCBS琼脂 Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar 250g

氯化钠多粘素B肉汤基础(SCPB) Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 250g

滴虫通用PCR检测试剂盒C-肽(夹心法二步法) 96TC-Peptide

小鼠小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3 96TAFP-L3 ELISA Kit

N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白 96TN-Cad(Human Neural-Cadherin) ELISA kit

人穿孔素/成孔蛋白 96TPF/PFP(Human Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit

小鼠凋亡相关因子 96TFAS/CD95(Mouse Factor-related Apoptosis) ELISA Kit

小鼠溶酶 96TLZM(Mouse Lysozyme) ELISA Kit

大鼠载脂蛋白H 96TApo-H ELISA Kit

大鼠单核细胞趋化蛋白4 96TMCP-4/CCL13 ELISA Kit

大鼠雌受体 96TER ELISA Kit

大鼠氢化可的松 96THYD ELISA Kit

人微管相关蛋白2 96TMAP-2(Human microtubule-associated protein 2) ELISA Kit

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