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产碱普罗威登斯菌PCR检测试剂盒

如果您对该产品感兴趣的话,可以
产品名称: 产碱普罗威登斯菌PCR检测试剂盒
产品型号: GOY-M0883
产品展商: 谷研
产品文档: 无相关文档
发布时间:2022-11-11

简单介绍

产碱普罗威登斯菌PCR检测试剂盒保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。


产碱普罗威登斯菌PCR检测试剂盒  的详细介绍

特点:

 

1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。

2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。

3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。

4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。

5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。

6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。

服务流程:

接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

产碱普罗威登斯菌PCR检测试剂盒

50T

GOY-M0883

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。

实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

羟胺溶液(1.5mol/L,pH8.0)  100ml

硼酸标记缓冲液(pH9.2)  500ml

硼酸盐缓冲液(BBS,pH8.4)  500ml

硼酸盐缓冲液(BBS,pH8.0)  500ml

硼酸盐溶液(0.1mol/L,pH8.5-10)  500ml

硼酸缓冲盐溶液(0.015mol/L,pH8.5)  500ml

硼酸-硼砂缓冲液(pH7.4-9.0)  500ml

硼砂缓冲液(0.05mol/L,pH9.3-10.1)  500ml

硼酸钠溶液(1mol/L,pH8.0)  500ml

硼酸溶液(4mol/L)  500ml

血清防腐剂(10×,荧光抗体用)  50ml

血清防腐剂(10×)  50ml

产碱普罗威登斯菌PCR检测试剂盒人碱性成纤维细胞生长因子 96TbFGF(Human basic fibroblast growth factor) ELISA Kit

大鼠β内啡肽受体 96TBeta-EPR ELISA Kit

小鼠钙通道阻滞剂 96TCCB(Mouse calcium channel blockers) ELISA Kit

大鼠肾上素能a1A受体 96TADRA1A ELISA Kit

小鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子 96TTSGF(Mouse Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor) ELISA KIT

CXC趋化因子受体1 96TCXCR1(Human CXC-chemokine receptor 1) ELISA Kit

大鼠颗粒酶B 96TGzms-B ELISA Kit

人肿瘤标志物 96THuman CA724 ELISA Kit

人肿瘤血管生长因子 96TTAF(Human tumor angiogenesis factors) ELISA Kit

大鼠甲状素抗体 96TTAb ELISA Kit

大鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉 96TDPD ELISA Kit

 

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