使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
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产品名称
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规格
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货号
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鸟分枝杆菌类结核亚型PCR检测试剂盒
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50T
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GOY-M0687
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特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
Gimeracil 二氢嘧啶脱氢酶(DPYD)抑制剂（Gimeracil） 1mL(10mM)|25mg|50mg|100mg|500mg
GDC-0349 mTOR抑制剂（GDC-0349） 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Daminozide KDM2/7JmjC亚家族抑制剂（Daminozide） 1mL(10mM)|1g|5g
Formononetin DU-145/PC-3细胞增殖抑制剂(Formononetin) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
R547 CDK1，2，4抑制剂（R547） 1mL(10mM)|10mg|100mg
Kobe0065 Ras-Raf相互作用抑制剂(Kobe0065) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
Lexibulin 微管蛋白聚集强效抑制剂（Lexibulin） 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Podophyllotoxin 微管组装和DNA拓扑异构酶II抑制剂（Podophyllotoxin） 1mL(10mM)|100mg|500mg
JNJ-38877605 c-Met抑制剂（JNJ-38877605） 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Ingenol PKC激活剂（Ingenol） 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
K-Ras G12C-IN-1 突变型K-Ras G12C抑制剂（K-Ras G12C-IN-1） 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
Lomeguatrib MGMT抑制剂（Lomeguatrib） 1mL(10mM)|10mg|50mg
鸟分枝杆菌类结核亚型PCR检测试剂盒PE-Cy3标记的羊抗大鼠IgG 0.1mlGoat Anti-rat IgG/PE-Cy3
Alexa Fluor 350标记的羊抗人IgG 0.1mlGoat Anti-human IgG/Alexa Fluor 350
生物素标记的小鼠抗兔IgG 0.1mlMouse Anti-rabbit IgG/Bio
PE-Cy5.5标记的小鼠抗豚鼠IgG 0.1mlMouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5
PE-Cy5.5标记的兔抗羊IgG 0.1mlRabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy5.5
Cy5标记的兔抗牛IgM 0.1mlRabbit Anti-Bovine IgM/Cy5
PE-Cy7标记的兔抗马IgG 0.1mlRabbit Anti-horse IgG/PE-Cy7
罗丹明标记的兔抗猴IgG 0.3mlRabbit Anti-Monkey IgG/RBITC
Cy5.5标记的兔抗小鼠k链 0.1mlRabbit anti-mouse Kappa light chain/Cy5.5
辣根过氧化物酶标记的兔抗水貂IgG 0.1mlRabbit Anti-Mink IgG/HRP
APC标记的驴抗豚鼠IgG 0.1mlDonkey Anti-Guinea pig IgG/APC