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成年小鼠心肌细胞?操作要点


发布时间: 2022-11-07

      心肌细胞构成心壁的主要成分。为心脏博动的物质基础。心肌细胞根据其生理功能可分为两类,即工作性心肌细胞和传导性心肌细胞。其中工作性心肌细胞构成心房肌和心室肌,是心壁的主要组成部分,具有兴奋、传导和收缩的功能;而自律性心肌细胞组成心脏的传导系统,包括窦房结、结间束、房室交界、左右束支和普肯耶纤维网。它们除有兴奋、传导的功能外,还有自律性,即不受神经支配与体液的影响,有产生周期性兴奋的能力。窦房结兴奋,将冲动扩布到心肌,引起心肌的收缩,从而产生心肌细胞的生物电现象。所以心肌细胞具有兴奋性、自律性、传导性和收缩性四种生理特性。公司提供的小鼠心肌细胞(乳鼠),采用胶原酶消化制备而来。细胞的培养采用公司砖利产品成年小鼠心肌细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞(如脂肪细胞、纤维细胞等)的污染,同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下,成年小鼠心肌细胞可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外**模型系统和调节特定基因的遗传功能。

       

成年小鼠心肌细胞操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)**天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

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